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31.
【目的】筛选安全的、具有优良特性的乳酸菌菌株,进一步研发益生制剂,为饲料添加剂等动物相关产品提供资源。【方法】从我国黑龙江省大兴安岭地区采集野猪粪便样品13份,编号后置于4℃保温箱迅速运回实验室,利用MRS培养基分离纯化乳酸菌。使用细菌基因组DNA提取试剂盒提取分离菌株的基因组DNA,利用细菌16S rDNA通用引物进行PCR鉴定,将扩增得到的序列测序后在NCBI上使用BLAST与GenBank数据库中序列进行对比分析,确定各菌株的分类学地位。将鉴定后的乳酸菌菌株分别接种于酸性(pH 3.0)和含胆盐(0.3%)的MRS培养基,在不同条件下评价乳酸菌菌株的耐酸、耐胆盐特性。将过夜培养的乳酸菌于室温条件下静置,在不同时间测定其OD600nm,进行自凝集能力评价;过夜培养的菌株分别与致病性埃希氏大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和鼠伤寒沙门氏菌3种致病菌混合后于室温静置,进行共凝集能力检测。在体外,分别进行乳酸菌菌株对Caco-2细胞和IPEC-J2细胞的黏附能力测定,评价不同菌株的黏附能力。通过测定乳酸菌菌株对致病性埃希氏大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和鼠伤寒沙门氏菌3种致病菌的抑菌环直径,评价分离菌株的抑菌活性。通过体内外试验评价乳酸菌菌株的安全性。在体外,分别以模式菌株嗜酸乳杆菌和金黄色葡萄球菌作为阴性对照和阳性对照,将3株乳酸菌菌株和对照菌株在血平板上划线,37℃厌氧孵育18—24 h,观察细菌菌落周围是否形成溶菌环,评价分离菌株的溶血特性。使用文献中已报道的毒力因子引物对分离的乳酸菌菌株进行PCR扩增,检测是否存在毒力因子的编码基因,评估分离菌株的安全性。在体内,将过夜培养的乳酸菌连续饲喂7周龄的BALB/c小鼠21 d,分别测定小鼠的初始体重和最终体重,观察计算体重变化情况;饲喂21 d后,解剖获取小鼠的脾脏、肝脏和肾脏计算器官指数,评价分离乳酸菌菌株的体内安全性。【结果】从野猪粪便中分离得到3株对酸和胆盐具备一定耐受力的乳酸菌,经鉴定分别为蒙氏肠球菌(Enterococcus mundtii)、耐久肠球菌(Enterococcus durans)和黏膜乳杆菌(Lactobacillus mucosae)。3株乳酸菌菌株均表现出较强的自凝集能力和对致病菌的共凝集能力,同时对Caco-2细胞和IPEC-J2细胞均表现出较强的黏附能力,抑菌试验结果显示黏膜乳杆菌对3种致病菌均具备较强的抑菌活性。经体内外安全性评价,3株乳酸菌菌株无溶血性,且均未检测到毒力基因,经其连续饲喂的小鼠行为表现正常、状态良好,其中,与对照组相比,黏膜乳杆菌饲喂后小鼠增重显著。【结论】从大兴安岭野猪粪便中分离的3株乳酸菌(特别是黏膜乳杆菌)具有良好的特性和安全性,具备进一步开发益生菌制剂的潜力。 相似文献
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白茶寿眉预防小鼠肥胖作用研究及安全性评价 总被引:1,自引:0,他引:1
取1、3、7年寿眉(白茶)制备白茶提取物(White tea extracts,WTEs)。在对雄性C57BL/6J小鼠喂饲高脂饲料的同时给予WTEs干预,诱导建立预肥胖模型。观察小鼠体质量增量、摄食量、脂肪和肝脏组织病理学变化,统计脂肪湿重,测定血脂及血转氨酶水平。q PCR测定小鼠肝脏中脂代谢相关基因表达。综合评价WTEs预防小鼠肥胖功效及其安全性,并对其机制进行探究。结果显示,WTEs在无肝毒性和生长抑制作用条件下,能抑制脂肪细胞分化和脂肪的过度积累,还能下调SREBP-1c、FAS和ACC1的转录水平,抑制肝脏脂肪酸合成和脂肪过度积累,有效预防肥胖和脂肪肝的发生。高剂量下,WTEs预防肥胖功效随白茶年份的增加而显著降低。 相似文献
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Retracted: Study of testis histology and sperm morphology in the Bunnei,Barbus sharpeyi (Gunther, 1874) induced by luteinizing hormone‐releasing hormone analogue and carp pituitary extract 下载免费PDF全文
This study was conducted to determine the effects of hormone treatment on testis structure in Barbus sharpeyi, as well as the morphology of sperm examined by scanning electronic microscopy (SEM). Male B. sharpeyi were divided into three groups (three fish per group) and injected with luteinizing hormone – releasing hormone analogue (LHRH–A2) or carp pituitary extract (CPE). The first and second groups were treated with 10 μg kg?1 LHRH–A2 and metoclopramide (MET), and their testis were sampled pre‐ and Poststripping respectively. The third group received 2 mg kg?1 CPE and were killed pre‐stripping. Based on the histological results obtained, the testicular connective tissue of the lumen was thicker, and seminal vesicles were of a lower volume, in fish injected with CPE in comparison to the other groups. After treatment with LHRH–A2 and MET, not all spermatozoa within the testis were ejaculated, and only a small amount of sperm was obtained by abdominal stripping. The highest and lowest diameters of connective tissue within lobules were observed in fish receiving CPE and LHRH–A2 treatments respectively. There was a significant difference (P < 0.05) in lobule space between the fish injected with the CPE and the fish injected with the LHRH–A2 and MET. The SEM results revealed that the spermatozoa of B. sharpeyi were composed of a spherical to elliptical head, a cylindrical midpiece, and a lengthy flagellum. In conclusion, it was found that injection with LHRH–A2 and MET improved the spermatogenic process in comparison to injection with CPE. 相似文献
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38.
牟楠 《农业机械化与电气化》2014,(1):79-80
为促进我国农机事业快速、健康发展,论述全面推进农机标准化建设的背景及条件,探讨加快农机标准化建设对我国农业发展的重要现实意义,总结我国农机标准化建设中存在的主要问题,并提出切实可行的发展措施。 相似文献
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基于一种不依赖交通事故和交通冲突数据的事前安全评价方法——安全服务水平评价方法,分析了影响公路平面交叉口安全服务水平的客观因素,建立了设计阶段安全评价模型。结合江苏省临海高等级公路的平交口数据进行实例验证,提出了设计阶段平交口安全评价方案及优化流程,改善效果明显。 相似文献
40.